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制備木寡糖的制備：1)耐高溫木聚糖內(nèi)切酶的制備：將以耐耐高溫木聚糖內(nèi)切酶基因構(gòu)建的重組質(zhì)粒pET-28b-CoXynA熱激轉(zhuǎn)化進(jìn)入EscherichiacoliTransetta(DE3)宿主，構(gòu)建表達(dá)耐高溫木聚糖內(nèi)切酶的基因工程菌。將上述基因工程菌于37℃培養(yǎng)，當(dāng)菌液OD600值達(dá)到0.8時(shí)，在37℃條件下，使用異丙基硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)誘導(dǎo)6h，后經(jīng)高壓均質(zhì)法破碎菌體后，將菌液上清依次過(guò)親和層析柱(鎳柱)、陰離子交換柱和分子篩(Superdex75)后制得耐高溫木聚糖內(nèi)切酶酶液(5.1mg/mL)。耐高溫木聚糖內(nèi)切酶在NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)中的編號(hào)為ADQ03732。2)雙功能木聚糖水解Chemicalbook酶的制備：將以雙功能木聚糖水解酶基因構(gòu)建的重組質(zhì)粒pET-28b-CLH10熱激轉(zhuǎn)化進(jìn)入EscherichiacoliBL21-Gold(DE3)宿主，構(gòu)建表達(dá)雙功能木聚糖水解酶的基因工程菌。將上述基因工程菌于37℃培養(yǎng)，當(dāng)菌液OD600值達(dá)到0.8時(shí)，降溫至18℃，在18℃條件下，使用異丙基硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)誘導(dǎo)12h，后經(jīng)高壓均質(zhì)法破碎菌體后，將菌液上清依次過(guò)親和層析柱(鎳柱)和分子篩(Superdex75)后制得雙功能木聚糖水解酶酶液(4.9mg/mL)。雙功能木聚糖水解酶在NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)中的編號(hào)為WP014043093。3)底物預(yù)處理：將玉米芯粉碎，烘干后過(guò)60目篩后稱重。